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DH10Bac感受态的制备.pdf
- DH10Bac感受态细胞的制备DH10Bac 感受态细胞是用来生产用于真核细胞蛋白表达的重组杆状病毒分子。高效DH10Bac 细胞含有父Bacmid 的bMON14272 和辅助质粒pMON7124。
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一步法感受态细菌制备试剂盒.pdf
- 受态细菌快速制备的试剂盒。一步法感受态细菌制备试剂盒是在经典的TSS法的基础上进行适当改良而成，既继承了TSS法的快速和简便，又在此基础上提高了感受态细菌的转化效率和易操作性。使用本试剂盒可以使感受态效率达到10 6 以上。不仅可以转化质粒，而且可以转化普通的连接产物。另外，对细菌的培养条件要求比较宽松，培养的细菌只要处于对数期内就可以使用本试剂盒制备感受态细菌。 使用本试剂盒操作非常简单，细菌培养好后仅需十几分钟就可以完成感受态细菌的制备。 本试剂盒适用于绝大部分常见的大肠杆菌，包括DH5α、JM109、TG1、HB101和XL-1等。对于一些用于蛋白表达或病毒质粒构建的特殊大肠杆菌也适用，制备出来的感受态菌转化质粒肯定没有问题，但如果转化连接产物有时效果不如DH5α 等其它常见的细菌。 本试剂盒提供了DH5α甘油菌作为菌种，可以用于制备感受态细菌。 本试剂盒可以分多次使用，共可以制备足够进行200-400次转化的感受态细菌。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 D0301-1 感受态制备试剂 10ml D0301-2 DH5α甘油菌 200µl — 说明书 1 份 保存条件： -20℃保存，一年有效。 注意事项： 需自行配制LB液体培养基和LB平板以用于细菌的培养和感受态效率的检测。 尽管经过我们的测试凡是处于对数期内的细菌都可以用于感受态细菌的制备，但如果细菌生长的OD 600 的值达到0.3-0.5左右时，制备出来的感受态效果最佳。 在制备感受态细菌的过程中均使用不含抗生素的LB。在使用感受态菌的过程中热休克后的37℃培养时也必须使用无抗生素的LB，即便转入的质粒是有抗性的。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 涂平板： 为取得最佳的感受态效率，必须先把甘油菌或其它形式保存的菌种涂LB平板，并培养过夜。 2. 接种： 取一有新鲜培养的菌种的LB平板，后续操作均在超净台内进行。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，从平板上挑取一个单克隆，然后把蘸有菌种的塑料枪头或牙签放到装有3毫升LB的细菌培养试管内。上述操作也可以使用接种环等进行操作。 3. 培养： 37℃约200rpm培养过夜，通常培养时间控制在16小时左右为宜。
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电转感受态细菌产品说明书(中文版).pdf
- 放进37℃摇床孵育1小时,速度为220RPM13.分别在5个100mm琼脂平板...电转感受态细菌GENMEDBJ5183细菌GENMEDBJ5183钙转感受态细菌GENMED乙醇...
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clpc 基因对变异链球菌感受态形成的影响.pdf
- 细菌学ｃｌｐＣ基因对变异链球菌感受态形成的影响徐巧丽 饶慧华 马晓波 黄朝阳 郑港森 张加勤 宋秀宇ＤＯＩ：１０．３７６０ ／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．０２５４－５１０１．２０１５．０４．００２基金项目：
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细菌培养及CaCl2法制备感受态细胞.pdf
- 重组DNA分子（质粒、噬菌体、粘性质粒）必须导入宿主菌中，通过细菌培养来扩增所需的重组DNA。
大肠杆菌与其它微生物一样，都具有稳定遗传性和变异性、遗传性，保证微生物本身特征的相对稳定，即无性繁殖过程中能够保持原有的性状，为菌种保藏提供了有利因此。
菌种保藏的原理是：通过低温、干燥、隔绝空气和断绝营养等手段，以达最大限度地降低菌种的代谢强度，抑制细菌的生长和繁殖。由于菌种的代谢相对静止，生命活动将处休眠状态，从而可以保藏较长时间。要求保存的菌种在复苏后除保持以前的生活与繁殖能力、不发生形态特征、生理状态及遗传性状的改变外，还不允许污染任何杂菌。此外，在保存前应确保菌种的单纯性，先分离单菌落后进行鉴定，然后再繁殖保存。
常用的长期保存法有：液体石蜡法、硅胶保存法、加入甘油或二甲基亚砜（DMSD）等保护剂。目前比较常用的甘油低温保存法(-70~-196)℃，由于在-70℃或液氮中冻存，细菌内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。在0~-70℃温度范围内，水晶呈针状，极易招致细菌的严重损伤。用电镜观察，可见细菌的核膜上有大量针尖样小孔。因此，为了避免0~-70℃冰晶的形成和细菌膜两侧离子平衡的破坏，需要加保护剂。甘油可降低冰点，在缓慢的冻结条件下，能使细菌内水分在冻结前透出细菌外。贮存在-70℃以下低温中能减少冰晶形成，甘油对细菌无毒性，分子量小，溶解度大，易穿透细菌。甘油的使用浓度范围为15%-50%，一般常用30%。在保存瓶中按1：1加入60%的甘油和菌液，混匀后贮存于-70℃或液氮中。复苏后细菌仍能生长，活力不受任何影响。
培养基是人工地将多种物质按各种微生物生长的需要配制而成的一种混合营养基质，用以培养或分离各种微生物。因此，营养基质应...www.ddcbbs.tk
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大肠杆菌感受态细胞制备方法及应用的研究进展.pdf
- 况应用双下肢皮肤牵引、骨盆悬吊或手法复位及骨牵引等处理[4]。膀胱破裂可因出血、休克、尿液外渗、继发感染等严重并发症而危及生命, 应引起足够的重视。参考文献:[1] 华积德, 黑龙江:吉林科学技术出
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大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA转化.pdf
- 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA转化
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革兰氏阳性菌自然感受态生理机制的研究进展.pdf
- 革兰氏阳性菌自然感受态生理机制的研究进展
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大肠杆菌高效感受态细胞的制备及快捷转化体系的建立.pdf
- 比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率,并优化了质粒DNA转化感受态细胞体系。结果表明：高效法制备的感受态细胞转化效率极显著高于普通法制备感受态细胞的转化效率,其效率提高了966.1%,而高效法感受态细胞转化效率与商品化的感受态细胞转化效率差异不显著。-80℃超低温长期保存时,相比较于15%甘油,以7%DMSO为冻存保护剂保存的感受态细胞其转化效率达到1.1×107,较15%甘油冻存保护剂保存的转化效率提高了69%。温浴5 min,冰浴10 min时,其转化效率最高,达到4.95×107。应用高效法制备的感受态细胞转化不同大小质粒的效率极显著高于普通大肠杆菌感受态细胞,其转化效率较普通大肠杆菌感受态细胞的提高了550%,而转化时间缩短至普通大肠杆菌感受态细胞的12.5%,仅为15min
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地衣芽孢杆菌感受态细胞的诱导形成及其高效电转化方法.pdf
- WuxiUniversity LightIndustry Vol.21 No. 5Sep. 2002 文章编号:1009 038X(2002)05 10. 基金项目:教育部高等学校骨干
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向豆丁求助：有没有感受态?
