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[理学]Western
Blotting
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m4t[理学]Western Blotting分子实验报告/>
Western Blotting<br /> 朱羽桐<br /> (生物学基地班)<br />
摘要: Western Blotting 是将经电泳分离后的蛋白质转移并固定在化学合成膜(常用的是<br /> 硝酸纤维素膜和尼龙膜)的支持物上,然后以特定的亲和反应、免疫反应或结合反应以及显 色系统分析此印迹。 此法用于检测材料中某种蛋白质的相对含量。 本实验采用人血清为材料, 对此样品进行 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,用电转移法将蛋白质转印到硝酸纤 维素薄膜上,以兔抗人 IgG 为第一抗体,以辣根过氧化物酶标记的羊抗兔 IgG 为第二抗体, 加入过氧化物酶的底物,检测人的 IgG。<br />
关键词: 关键词: Western Blotting SDS-PAGE 电转移法 NC 膜 人血清 IgG 一抗 二抗 引言: 引言: 本次试验的目的是使同学们掌握 Western Blotting 法鉴定目标蛋白的原理和熟悉<br /> Western Blotting 的方法,并了解抗原抗体结合反应的影响因素。<br />
Western Blotting 的 blotting 译为印迹法,是指将样品转移到固相载体上,而后利用相 应的探测反应来检测样品的一种方法。1975 年,Southern 建立了将 DNA 转移到硝酸纤维素 膜(NC 膜)上,并利用 DNA-RNA 杂交检测特定的 DNA 片段的方法,称为 Southern 印 迹法。而后人们用类似的方法,对 RNA 和蛋白质进行印迹分析,对 RNA 的印迹分析称为 Northern 印迹法,对单向电泳后的蛋白质分子的印<a name="page"></a>
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yigeta
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