滴中孔培养法研究牛卵泡颗粒细胞凋亡与卵母细胞发育能力的关系

本文以牛为实验动物，建立了比较完善的滴中孔(WID)培养系统，并应用此系统研究了颗粒细胞凋亡对卵母细胞发育能力、COCs形态以及卵丘扩展的影响，并探讨了以卵泡液中游离颗粒细胞的密度作为一种判定卵母细胞发育能力指标的可行性。实验结果表明： 1.HE染色结果与TUNEL染色一致，并且具有简便及廉价等优点。 2.培养滴体积和培养密度显著影响卵母细胞的成熟质量和胚胎体外发育能力。IVM时，采用10卵/40μl、25卵/100μl可显著提高卵母细胞的成熟质量，而培养密度过大则会削弱卵母细胞的成熟质量；在培养密度不变的情况下，培养滴体积对卵母细胞的成熟质量影响不大。IVC时，采用10胚胎/40μl、20胚胎/40μl、25胚胎/100μl、50胚胎/100μl可显著提高胚胎体外发育能力，而培养密度过小..