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《酶工程》课件-酶的提取与分离纯化.ppt
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果胶酶作用分离纯化技术现代分离纯化与分析技术酶学性质硕士论文.pdf
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1295.龙须菜活性多糖提取、分离纯化、结构及其活性的研究.doc
龙须菜活性多糖提取、
分离纯化、结构及其活性的研究

摘 要

本文首次以免疫活性为筛选指标、用冻溶除胶法分离活性多糖,运用化学和色谱双重分析方法系统深入地研究了龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)活性多糖的提取优化、分离纯化以及粗多糖和均一多糖的化学组成、结构和活性。研究结果表明:
1、通过冻溶法得到龙须菜胶体多糖(NGF)和非胶体多糖(SGF),其中SGF的溶出率和多糖含量均显著高于NGF,但NGF的免疫活性极显著高于SGF(P<0.01);
2、不同提取水温对龙须菜非胶体粗多糖的得率影响显著(n=24, P<0.01), 50℃水温提取时, 龙须菜非胶体粗多糖的得率最高9.11±0.31%, 蛋白含量最低仅为4.38±0.13%, 当提取水温超过60℃时, 非胶体粗多糖的得率显著下降;龙须菜非胶体粗多糖均表现出显著的体外免疫活性, 其中50℃提取水温组的活性显著高于其它各温度组,各组没有表现出抗HSV-Ⅰ型和Ⅱ型病毒活性; 各组非胶体粗多糖的3,6内醚半乳糖含量在15-20%之间, 而半乳糖的含量则在30-40%之间,其中内醚半乳糖和半乳糖之和占已知总糖的90%以上,50℃提取水温组硫酸基含量略高于其它组。
3、对50℃水温提取条件进行了优化,发现提取次数对溶出率有着较大的影响,提取3次得率最高为13.63%,提取1次仅为7.63%, 但提取次数、料水比和提取时间对非胶体粗多糖的多糖含量、蛋白含量、免疫活性均无显著影响,通过正交实验和结合实际生产能耗因素,确定最佳提取工艺为: 提取水温为50 ℃, 料水比为1:40(质量比), 提取2次, 每次浸提3小时。
4、用离子色谱法对NGF进行分离得到盐相(NGFS)和水相(NGFW), NGFS的得率、3,6内醚半乳糖和半乳糖含量分别为:51.10±4.10%、27.83±0.23%和62.10±1.88%显著高于水相的0.60±0.13%、17.98±0.23%和29.31±0.34% (P < 0.01), 水相的多糖种类、多糖含量、蛋白含量和免疫活性要高于盐相; 从得率和纯度两方面考虑选择NG
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蛋白质的分离纯化.ppt
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